Dynamic changes in and time sequence of ultraviolet B-induced apoptosis in rat corneal epithelial cells / Alterações dinâmicas na sequência temporal da apoptose induzida por radiação ultravioleta B em células epiteliais da córnea de ratos

ABSTRACT Purpose: To systematically examine the dynamic changes and time sequence in corneal epithelial cell apoptosis after excessive ultraviolet B irradiation. Methods: Ultraviolet B (144 mJ/cm2) was used to irradiate rat corneal epithelial cells for 2 h. Cell morphology was observed on differential interference contrast microscopy, and the numbers of the different kinds of apoptotic cells were counted using the ImageJ software. Cell viability was measured with the 3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5- diphenyl-2-H-tetrazolium bromide method. Cell apoptotic rate and loss of mitochondrial membrane potential were detected using flow cytometric analyses. The expression levels of 3 apoptotic genes were measured with real-time quantitative polymerase chain reaction at different time points within 0-24 h after irradiation. Results: After 144-mJ/cm2 ultraviolet B irradiation for 2 h, the expression levels of caspase-8 and Bax were highest at 0 h; furthermore, the mitochondrial membrane potential decreased at 0 h and remained constant for 6 h in a subsequent culture. At 6 h, caspase-3 was activated. The decrease in cell viability and increase in apoptotic rate peaked at 6 h. The caspase-3 expression level decreased within 12-24 h, which led to a decline in apoptotic rate and change in apoptotic stage. Conclusions: The corneal epithelial cells exhibited rapid apoptosis after ultraviolet B irradiation, which was associated with both extrinsic and intrinsic pathways.

RESUMO Objetivos: Explorar sistematicamente as mudanças dinâmicas e a sequência temporal no processo de apoptose de células epiteliais corneanas após excesso de irradiação com ultravioleta B. Métodos: A radiação ultravioleta B (144 mJ/cm2) foi utilizada para irradiar células epiteliais da córnea de rato durante 2h. A morfologia celular foi observada por meio de microscópio de contraste de interferência diferencial, e os números de diferentes tipos de células apoptóticas foram contados e registrados pelo software ImageJ. A viabilidade celular foi medida pelo método brometo de 3- (4, 5-dimetil-2-tiazolil) -2, 5-difenil-2-H-tetrazólio. A taxa apoptótica celular e a perda do potencial da membrana mitocondrial foram detectadas por meio de análises citométricas de fluxo. Os níveis de expressão de três genes apoptóticos foram medidos por reação em cadeia da polimerase quantitativa em tempo real em diferentes momentos dentro de 0-24 h após a irradiação. Resultados: Após 144 mJ/cm2 de irradiação com ultravioleta B por 2h, os níveis de expressão de caspase-8 e Bax foram maiores em 0h; o potencial da membrana mitocondrial diminuiu a 0h e permaneceu constante por 6h na cultura subsequente. Às 6h, a caspase-3 foi ativada. A diminuição da viabilidade celular e o aumento da taxa apoptótica atingiu o pico em 6h. A expressão de caspase-3 diminuiu dentro de 12 - 24 h, levando a um declínio na taxa apoptótica e alteração no estágio apoptótico. Conclusões: As células epiteliais da córnea apresentaram uma apoptose rápida após excesso de irradiação com ultravioleta B, e esse processo foi associado tanto à via extrínseca como à via intrínseca.

Cytotoxicity and Elemental Release of Dental Acrylic Resin Modified with Silver and Vanadium Based Antimicrobial Nanomaterial / Citotoxicidade e Liberação Elementar de Resina Acrílica Odontológica Modificada com Nanomaterial Antimicrobiano a Base de Prata e Vanádio

The acrylic resin used for the prosthesis base accumulates biofilm, causing diseases such as stomatitis. The addition of some nanoparticles promotes antimicrobial action. This study incorporated the nanostructured silver vanadate decorated with silver nanoparticles (AgVO3) to the acrylic resin by two methods and evaluated the cytotoxicity for human gingival fibroblasts (HGF) and the released silver and vanadium ions. The concentrations of 0.5, 1, 2.5, and 5% of AgVO3 was incorporated by vacuum spatulation and polymeric film. The vacuum spatulation was performed for 60 s using the Turbomix equipment, and the polymeric film was obtained from the polymer solubilization in chloroform, the film was subjected to a cryogenic grinding, and the powder obtained was manually mixed at the monomer. HGF cell viability was assessed after 24 hours, 7 and 14 days by the MTT assay. The release of silver (Ag) and vanadium (V) ions were quantified by inductively coupled plasma mass spectrometry after 30 days. Kruskal-Wallis and Dunn's test were applied (α = 0.05). The HGF viability was inversely proportional to the incubation time. Both incorporation techniques and the negative and positive control groups presented significant statistical differences (p<0.05). The experimental groups presented no statistical difference compared to the negative control (p>0.05), except the vacuum spatulation group with 5% of AgVO3 that showed greater viability than the negative control (p=0.013) in 24 hours. The release of Ag and V ions was proportional to the concentration of AgVO3 The 5% group presented a significant difference compared to the other groups (p<0.05). In conclusion, the acrylic resin with and without the AgVO3 incorporation had a small cytotoxic potential for HGF in 24 hours, with a lower viability in longer contact times; the release of Ag and V ions was proportional to the concentration of AgVO3, not influencing cell viability. (AU)

A resina acrílica utilizada para a base da prótese acumula biofilme, causando doenças como a estomatite. A adição de algumas nanopartículas promove ação antimicrobiana. Este estudo incorporou o vanadato de prata nanoestruturado decorado com nanopartículas de prata (AgVO3) à resina acrílica por dois métodos e avaliou a citotoxicidade para fibroblastos gengivais humanos (HGF) e os íons prata e vanádio liberados. As concentrações de 0,5%, 1%, 2,5% e 5% de AgVO3 foram incorporadas por espatulação a vácuo e filme polimérico. A espatulação a vácuo foi realizada por 60 s no equipamento Turbomix, e o filme polimérico foi obtido a partir da solubilização do polímero em clorofórmio, o filme foi submetido a uma moagem criogênica e o pó obtido foi misturado manualmente ao monômero. A viabilidade celular de HGF foi avaliada após 24 horas, 7 e 14 dias pelo ensaio de MTT. A liberação de íons prata (Ag) e vanádio (V) foi quantificada por espectrometria de massa com plasma indutivamente acoplado após 30 dias. Os testes de Kruskal-Wallis e Dunn foram aplicados (α=0,05). A viabilidade de HGF foi inversamente proporcional ao tempo de incubação. As técnicas de incorporação e os grupos controle negativo e positivo apresentaram diferença estatisticamente significante (p<0,05). Os grupos experimentais não apresentaram diferença estatística em relação ao controle negativo (p>0,05), exceto o grupo de espatulação a vácuo com 5% de AgVO3 que apresentou maior viabilidade que o controle negativo (p = 0,013) em 24 horas. A liberação de íons Ag e V foi proporcional à concentração de AgVO3. O grupo 5% apresentou diferença significativa em relação aos demais grupos (p <0,05). Em conclusão, a resina acrílica com e sem a incorporação de AgVO3 apresentou um pequeno potencial citotóxico para o HGF em 24 horas, com menor viabilidade nos tempos de maior contato, e a liberação de íons Ag e V foi proporcional à concentração de AgVO3, não influenciando na viabilidade celular. (AU)

Effect of preheating on cytotoxicity and physicochemical properties of light-cured calcium-based cements / Efeito do pré-aquecimento na citotoxicidade e propriedades físico-químicas de cimentos à base de cálcio fotopolimerizáveis

ABSTRACT The aim of this study was to evaluate the degree of conversion, cytotoxicity, solubility and pH of photopolymerizable calciumbased cements submitted to preheating. The degree of conversion was analyzed by Fourier transform infrared, cytotoxicity by the MTT test and solubility through loss of mass. The data were subjected to statistical tests (ANOVA / Tukey's, p<0.05). The photopolymerizable materials showed a low degree of conversion, regardless of preheating. All materials caused a reduction in cell viability at 24 hours and 7 days, with the Dycal (control) being more cytotoxic. Heat had a positive effect on Biocal at 7 days. Dycal is the most soluble material. Heat had no effect on the solubility or pH of the polymerizable materials. It is concluded that photopolymerizable calcium-based cements have a low degree of conversion and are soluble, which results in mild to moderate cytotoxicity.

RESUMO O objetivo do presente estudo foi avaliar o grau de conversão, citotoxicidade, solubilidade e pH de cimentos à base de cálcio fotopolimerizáveis submetidos a pré-aquecimento. O grau de conversão foi analisado por espectroscopia no infravermelho com transformada de Fourier, a citotoxicidade pelo teste de MTT e a solubilidade através da perda de massa. Os dados foram submetidos a testes estatísticos (ANOVA/Tukey, p<0,05). Os materiais fotopolimerizáveis apresentaram baixo grau de conversão, independente do pré-aquecimento. Todos os materiais causaram redução da viabilidade celular nas análises de 24 horas e 7 dias, sendo que o Dycal (controle) apresentouse mais citotóxico e o calor apresentou efeito positivo sobre o Biocal na análise de 7 dias. O Dycal é o material mais solúvel e o calor não causou efeito na solubilidade e pH dos materiais polimerizáveis. Assim, conclui-se que os cimentos à base de cálcio fotopolimerizáveis apresentam baixo grau de conversão e são solúveis, que resulta em citotoxicidade suave e moderada.

Efeito do substituto ósseo particulado associado ou não ao MTA na citotoxicidade, resposta tecidual e reparo ósseo em defeitos críticos em calvária de ratos / Effect of particulate bone substitute associated or not to MTA on cytotoxicity, tissue response and bone repair in critical defects in rats calvaria

A utilização de biomateriais que visam devolver o volume ósseo perdido após a perda dentária tem se expandido. O osso é um tecido conjuntivo altamente especializado, possuindo dinâmica aposicional onde o equilíbrio entre neoformação e reabsorção envolve a interação de fatores endócrinos, parácrinos e autócrinos. Diversas associações de materiais diversos e substitutos ósseos têm sido estudadas, porém, o MTA (Agregado Trióxido Mineral) ainda carece de informações acerca da sua utilização como substituto ósseo ou em associação com demais substitutos. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar a influência da presença do MTA Angelus Branco® nas proprorções de 5%, 10% e 15% em associação com substituto ósseo de Hidroxiapatita e ß- Tricálcio Fosfato na citotoxicidade, resposta tecidual e reparo ósseo, em defeito crítico em calvária de ratos. Para tanto, utilizou-se cultura celular da SAOS-2 para avaliação citológica e ensaio MTT do contato direto e eluentes. Também foram utilizados 112 ratos machos Wistar distribuídos em 7 grupos e avaliados em 2 tempos (7 e 28 dias). Após eutanasiados foram submetidos à microtomografia e por coloração de hematoxilina e eosina para análise histológica e histomorfométrica. A análise da homocedasticidade foi realizada pelo teste Shapiro-Wilk, para distinção dos dados paramétricos e não paramétricos. Para análise dos dados paramétricos, foi realizada análise de variância One-Way (ANOVA One-Way) e realizado o pós-teste de Tukey para os parâmetros microtomográficos e para a citotoxicidade foi aplicado o teste de correção de Bonferroni. Para os dados não paramétricos utilizou-se o Kruskal-Wallis e Mann Whitney. Adotou-se o nível de significância de p <0,05. Os parâmetros volume ósseo (BV), porcentagem de volume ósseo (BV/TV), espessura do trabeculado ósseo (Tb.Th) e número de trabéculas (Tb.N) não apresentaram diferenças estatísticas. Sendo o grupo Osteosynt® +15% MTA o grupo com maiores valores médios para os parâmetros BV, BV/TV, Tb.Th e Tb.N. A análise histomorfométrica para neoformação óssea e reabsorção dos biomateriais não apresentaram diferenças estatísticas. De acordo com os resultados, pode-se concluir que, estatisticamente, a adição de MTA nas 3 proporções testadas não demonstrou efetividade quando comparada ao uso isolado dos substitutos ósseos Bio-Oss® e Osteosynt® e coágulo. No entanto, foi evidenciada tendências à superioridade numérica quanto ao volume ósseo neoformado da associação Osteosynt® + 15% MTA aos 7 dias e Osteosynt® + 5% MTA e Osteosynt® + 10% MTA nas análises aos 28 dias(AU)

The use of biomaterials that aim to return lost bone volume after tooth loss has expanded. Bone is a highly specialized connective tissue with appositional dynamics where the balance between neoformation and resorption involves the interaction of endocrine, paracrine and autocrine factors. Several associations of different materials and bone substitutes have been studied. However, the MTA (Mineral Trioxide Aggregate) still lacks information about its use as bone substitute or in association with other substitutes. Thus, the aim of this study was to evaluate the influence of presence of MTA Angelus Branco® in the 5%, 10% and 15% proportions in association with Hydroxyapatite and ß-Tricalcium Phosphate bone substitute in cytotoxicity, tissue response and bone repair in critical defect in rat calvaria. For this, SAOS-2 cell culture was used for cytological evaluation and MTT assay of direct contact and eluents. We also used 112 male Wistar rats distributed into 7 groups and evaluated at 2 distinct times (7 and 28 days). After euthanasia, the specimens were submitted to microtomography and hematoxylin and eosin staining for histological and histomorphometric analysis. The analysis of homoscedasticity was performed by the Shapiro-Wilk test for distinction of parametric and non-parametric data. For analysis of parametric data, one-way analysis of variance (One-Way ANOVA) was performed and Tukey's post-test was performed for the microtomographic parameters and for the cytotoxicity the Bonferroni correction test was applied. For non-parametric data we used the Kruskal-Wallis and Mann Whitney. The significance level of p <0.05 was adopted. The parameters bone volume (BV), bone volume percentage (BV / TV), bone trabecular thickness (Tb.Th) and number of trabeculae (Tb.N) showed no statistical differences. The Osteosynt® + 15% MTA group was the group with the highest mean values for the parameters BV, BV / TV, Tb.Th and Tb.N. Histomorphometric analysis for bone neoformation and biomaterial resorption showed no statistical differences. According to the results, it can be concluded that, statistically, the addition of MTA in the 3 tested proportions did not show effectiveness when compared to the isolated use of the Bio-Oss® and Osteosynt® bone substitutes and clot. However, trends in numerical superiority regarding the newly formed bone volume of the association Osteosynt® + 15% MTA at 7 days and Osteosynt® + 5% MTA and Osteosynt® + 10% MTA in the analyzes at 28 days were evidenced(AU)

Cytotoxicity of three light-cured resin cements on 3T3 fibroblasts / Citotoxicidade de três cimentos resinosos fotopolimerizáveis sobre fibroblastos 3T3

Introduction: Light-cured resin cements are the first choice for the cementation of laminate veneers. Ideally, they should be biocompatible and offer minimum risks to patients. Objective: The aim of this study was to evaluate, in vitro, the cytotoxicity of three resin cements: Variolink II, Ivoclar Vivadent (C1), Allcem Veneer, FGM (C2), and Rely X Veneer, 3M ESPE (C3). Material and method: Twenty four samples of each of the cements were fabricated in a standardized metal mold, light activated, and transferred to a 96-well cell plate with culture of fibroblasts. After 24, 48, and 72h of incubation, cytotoxicity was assessed and cell viability was calculated by the methyl-thiazol-tetrazolium (MTT) colorimetric assay. Absorbance was measured at 570 nm using a microplate spectrophotometer. Result: The following results were found: Variolink II presented viability of 72.24% (SD 6.80) after 24h, 83.92% (SD 5.26) after 48h, and 92.77% (SD 5.59) after 72h; Allcem Veneer exhibited viability of 70.46% (SD 12.91) after 24h, 85.03% (SD 21.4) after 48h, and 70.46% (SD 12.91) after 72h; Rely X Veneer showed viability of 5.06% (SD 0.88) after 24h, 5.84% (SD 1.18) after 48h, and 6.99% (SD 1.34) after 72h. Conclusion: Under these testing conditions, Rely X Veneer presented significantly higher cytotoxicity compared with those of the other light-cured resin cements assessed.

Introdução: Cimentos resinosos fotopolimerizáveis são materiais de eleição para a cimentação de facetas laminadas. Devem ser biocompatíveis oferencendo riscos mínimos ao uso clínico em pacientes. Objetivo: O objetivo desse trabalho foi avaliar in vitro a citotoxicidade de três cimentos resinosos: Variolink II (Ivoclar Vivadent), Allcem Veneer, (FGM) e Rely X Veneer (3M ESPE). Material e método: Vinte e quatro corpos de prova de cada cimento foram confeccionados em matrizes metálicas padronizadas e inseridos em placa de cultura de células de noventa e seis poços contendo fibroblastos da linhagem 3T3. As células foram cultivadas em meio de cultivo celular RPMI 1640 com 5% de soro fetal bovino, com 0,1% de penicilina/estreptomicina em estufa a 37◦C, em atmosfera úmida com 5% de CO2. O grau de citotoxicidade de cada cimento foi avaliado após os tempos de contato de 24h, 48h e 72h através do método MTT (3-(4,5-dimetiltiazol-2yl)-2,5- difenil brometo de tetrazolina), que avalia a viabilidade celular pela função mitocondrial. Após os tempos estabelecidos, as amostras foram removidas, tratadas e levadas ao espectofotômetro de microplaca para leitura da absorbância em 570nm. Resultado: O cimento Variolink apresentou em 24h viabilidade de 72,24% (±6,80), em 48h de 83,92% (± 5,26) e de 92,77% (±5,59) em 72h. Allcem Veneer apresentou viabilidade de 70,46% (± 12,91) em 24h; 85,03% (± 21,4) em 48h e 70,46% (± 12,91) em 72h. O RelyX Veneer demonstrou viabilidade de 5,06% (± 0,88) em 24h; 5,84% (± 1,18) em 48h e 6,99% (± 1,34) em 72h. Conclusão: Estes resultados demonstraram que o cimento Rely-X se apresentou significativamente mais citotóxico nas condições testadas.

Avaliação comparativa da citotoxicidade dos cimentos MTA Fillapex e AH Plus: revisão integrativa / Comparative evaluation of cytotoxicity of MTA Fillapex and AH Plus cements: an integrative review

Objetivo: O objetivo deste estudo foi realizar uma revisão integrativa comparando a citotoxicidade dos cimentos MTA Fillapex e AH Plus aos tecidos periapicais. Métodos: Foram utilizados artigos na íntegra, nos idiomas português e inglês, publicados durante os períodos de 2010 a 2017, selecionados na base de dados Scielo e Pubmed, utilizando os seguintes descritores: AH Plus, MTA Fillapex e citotoxicidade. Foram excluídos, os trabalhos no idioma não inglês, artigos sem resumo, trabalhos realizados em dentes decíduos e casos clínicos. Resultados: Foram identificados dezenove artigos nas bases de dados, sendo dois artigos no SciELO e dezessete artigos no Pubmed. Após a leitura aprofundada desses artigos, foram excluídos seis artigos por não atenderem aos critérios de inclusão. Dessa forma, a amostra final foi composta por treze artigos científicos, todos de modelos experimentais, publicados em periódicos de procedência internacional, da área odontológica, sendo 50% dos estudos do ano de 2013. Conclusão: Os estudos demonstraram que o MTA Fillapex apresentou maior citotoxicidade aos tecidos periapicais que o cimento AH Plus.(AU)

Aim: This study aimed to perform an integrative review, comparing the cytotoxicity of MTA Fillapex and AH Plus cements to periapical tissues. Methods: Full articles were used in the Portuguese and English languages, published during from 2010 to 2017, selected in the Scielo and Pubmed database, using the following descriptors: AH Plus, MTA Fillapex, and cytotoxicity. Excluded were nonEnglish works, articles without abstracts, work done on primary teeth, and clinical cases. Results: Nineteen articles were identified in the databases, two articles in SciELO and seventeen articles in Pubmed. After the in-depth reading of these articles, six articles were excluded because they did not meet the inclusion criteria. Thus, the final sample consisted of thirteen scientific articles, all of which were experimental models published in international journals in the field of dentistry, with 50% of the studies published in 2013. Conclusion: The studies showed that MTA Fillapex presented greater cytotoxicity to periapical tissues than did the AH Plus cement.(AU)

Efeito de cianoacrilatos e adesivo tissular a base de veneno de cobra na citotoxicidade sobre fibroblastos gengivais e estresse oxidativo sobre células do biofilme de C. albicans / Effect cyanoacrylate and snake venom tissue adhesive on cytotoxicity of gingival fibroblasts and oxidative stress of C. albicans biofilms

A estomatite protética é uma patologia que acomete muitos usuários de prótese total. Um dos principais fatores da sua etiologia é a fácil adesão de microrganismos, como a Candida albicans, à resina acrílica, principalmente devido às características de superfície facilitadoras deste material. Por esta razão, estuda-se materiais que possam modificar as características de superfície da resina acrílica sem alterar as suas propriedades mecânicas. A investigação das propriedades desses materiais, como a biocompatibilidade e como eles influenciam as células de C. albicans, é de extrema importância para uma futura aplicação clínica. Dessa forma, a proposta desta pesquisa foi avaliar a citotoxicidade sobre fibroblastos gengivais humanos (FGH) e o estresse oxidativo causado em células de C. albicans por 6 produtos (etil-cianoacrilato convencional -ECAc; etil-cianoacrilato em forma de gel formulação a -ECAga; etil-cianoacrilato em forma de gel formulação b -ECAgb; butil-cianoacrilato - BCA; octil-cianoacrilato OCA; selante tissular a base de veneno de cobra-VC;), que quando aplicados na superfície da resina acrílica, modificam suas características de superfície, visando diminuir a formação do biofilme de C. albicans. Espécimes de resina acrílica foram confeccionados e duas camadas de cada produto foram aplicadas nas superfícies. Cada espécime foi deixado em 1, 066 mL de meio de cultura durante 24 horas para extração e utilização do meio condicionado para os dois ensaios. Para a investigação da citotoxicidade, os FGH foram cultivados em placas de 96 poços, meios condicionado de cada grupo foram depositados em cada poço onde permaneceram em contato por 24, 48 e 72 h. Após o processamento para o ensaio de MTT as placas foram analisadas em espectrofotômetro a 500 nm. Foram realizados quatro experimentos independentes em triplicata (n=12). Para a investigação de estresse oxidativo (ERO) causado em C. albicans, biofilme foi desenvolvido em placas de 96 poços durante 24 h. Então, os meios condicionados foram adicionados aos poços e a placa foi mantida em agitadora durante 1 h. Após a retirada dos meios condicionados, foi adicionado a cada poço o reagente CellRox® Deep Red e leituras foram realizadas a cada 30 min durante 3 h em fluorímetro a 640/665nm. Amostras foram coletadas e ensaio de cultura microbiológica foi executado para a realização da normalização dos valores. Foram realizados 3 experimentos independentes em triplicata (n=9). Os resultados obtidos pelo ensaio MTT foram analisados por meio de ANOVA a 2 critérios, seguido pelo teste Tukey para a comparação entre grupos (p<0,05). Para o ensaio ROS, a análise estatística realizada foi ANOVA a 1 critério, seguida, igualmente, por Tukey (p<0,05). Os resultados mostraram que todos os grupos apresentaram certo grau de citotoxicidade quando comparados ao controle, com exceção do VC (ECAc

Denture stomatitis is a disease that affects many denture wearers. One of the main factors of its cause is the easy adhesion of microorganisms, such as Candida albicans, to acrylic resin, mainly due to its permissive surface characteristics. For this reason, materials that can modify surface characteristics of acrylic resin without changing its mechanical properties are being studied. The investigation of these materials features, such as biocompatibility and how they affect Candida albicans, is of utmost importance for future clinical application. Thus, the purpose of this study was to evaluate the cytotoxicity of human gingival fibroblasts (HGF) and oxidative stress in C. albicans cells after contact with 6 experimental products (conventional ethyl-cyanoacrylate -ECAc; ethyl-cyanoacrylate in gel formulation "a" -ECAga; ethyl-cyanoacrylate in gel formulation "b" -ECAgb; butyl- cyanoacrylate - BCA; octyl-cyanoacrylate -OCA; tissue adhesive based on snake venom -VC) applied to the surface of the resin acrylic, modifying its surface characteristics, in order to decrease C. albicans biofilm formation. Acrylic resin specimens were manufactured and two layers of each product were applied to the surfaces. Each specimen was immersed in 1,066 mL of growth media for 24 hours for extraction and the resulting conditioned media were used for both tests. To investigate cytotoxicity, HGF were cultured in 96-well plates and conditioned media from each group were deposited into each well, where they remained in contact for 24, 48 and 72h. After the MTT assay processing, plates were analyzed in a spectrophotometer at 500 nm. Four independent experiments were performed in triplicate (n=12). To investigate oxidative stress (ROS), C. albicans biofilm was developed in 96-well plates for 24 h, conditioned media were added to the wells and the plate was allowed to stir for 1 h. Then, conditioned media were removed and CellRox® Deep Red reagent was added to each well. Readings were performed every 30 min for 3 h in fluorometer at 640/665nm. Samples were collected and microbiological culture test was executed to values normalization. Three independent experiments were performed in triplicate (n=9). Results obtained in MTT assay were analyzed by two-way ANOVA and Tukey's test for comparison between groups (p<0.05). for comparison between groups (p<0.05). For ROS results, one-way ANOVA was performed followed by Tukey test, as well (p<0.05). The results showed that all groups presented different degrees of cytotoxicity when compared to control group, except for VC (ECAc

Resposta in vitro de células pré-osteoblásticas em cerâmica de hidroxiapatita / In vitro evaluation of pre-osteoblastic cells in hydroxyapatite ceramic

Com a evolução do Biomateriais houve melhorias nas opções de tratamentos e atualmente são utilizados em substituição de partes do corpo que foram perdidas e promovem a recuperação de funções biológicas. Dentre eles existem as chamadas Biocerâmicas, que incluem alumina, zircônia e derivadas de fosfato de cálcio. A hidroxiapatita possui composição e estrutura minerais semelhantes à fase mineral óssea e apresenta como propriedades a biocompatibilidade, osteocondutividade e bioatividade. O trabalho avaliou a viabilidade celular em cerâmica de hidroxiapatita experimental de origem bovina em comparação com dois tipos de zircônia comerciais e liga de titânio comercialmente puro, para que futuramente possa ser utilizada como material base para implantes dentários. A avaliação in vitro foi realizada por meio de testes nos quais células pré-osteoblásticas cultivadas de linhagem murina MC3T3-E1 foram colocadas em contato indireto e direto com estes materiais. Para viabilidade celular (n=8) foram feitos testes de ensaio MTT e Cristal Violeta em duplicata e após 24, 48 e 72 horas os níveis de absorbâncias foram analisados por meio de espectrofotometria no leitor de Elisa. Para as analises por microscopia eletrônica de varredura (n=6) as células foram plaqueadas diretamente sobre as superfícies dos discos, fixadas em vapor de tetróxido de ósmio 2% após 24 e 48 horas, seguido da metalização após 48 horas da fixação das células para análise em Microscópio Eletrônico de Varredura. Os resultados para viabilidade indireta foram submetidos ao teste paramétrico ANOVA, seguido de teste de Tukey (p<0,05). Tanto no teste de MTT quanto no Cristal Violeta, de acordo com o grupo controle positivo, todos os grupos apresentaram resultados satisfatórios. A cerâmica de hidroxiapatita não apresentou diferença estatística significante, demonstrando não ser um material citotóxico. Pelas imagens geradas no MEV do teste de viabilidade direta, verificou-se que houve adesão...

With the evolution biomaterials there were improvements in treatment options, and are currently used in replacement body parts that were lost and promote the recovery of biological functions. Among them are the bioceramic which include alumina, zirconia and calcium phosphate derivative. Hydroxyapatite has mineral composition and structure similar to bone mineral phase and can be used as a biomaterial having biocompatibility, osteoconductivity and bioactivity. The study evaluated the cell viability in experimental hydroxyapatite ceramic bovine compared the two types of commercial zirconia and titanium alloy commercially pure, so that in future it can be used as base material for dental implants. In vitro evaluation was carried by means of tests in which the pre-osteoblastic cells MC3T3-E1 murine lineage cultured were placed in indirect and direct contact with these materials. For cell viability (n=8) were carried MTT assay and Crystal Violet tests in duplicate and after 24, 48 and 72 hours the absorbance levels were analyzed by spectrophotometry Elisa reader. For analysis by Scanning Electron Microscope variable pressure (n = 6) cells were plated directly on the discs surfaces, fixed in osmium tetroxide steam 2% after 24 and 48 hours, followed by metallization after 48 of cells fixation. The results for the cell viability were submitted to parametric test ANOVA, followed by Tukey test (p<0.05). Both in the MTT assay as Crystal Violet all groups exhibited satisfactory results absent cytotoxicity. By means of the SEM images produced, it was found that there was adhesion and proliferation of cells on the materials surfaces in the two periods. Therefore, it can be stated that the hydroxyapatite ceramic was presented as a biocompatible material.

Seiva Sangue de Dragão (Croton lechleri) como meio de estocagem de dentes avulsionados: estudo in vitro da viabilidade celular / Dragon's Blood sap (Croton lechleri) as storage medium for avulsed teeth: an in vitro study of cell viability

O sucesso do reimplante dentário depende da condição apresentada pelo ligamento periodontal cementário pós-avulsão que pode variar dependendo, dentre outros fatores, do meio de estocagem no qual esses dentes foram mantidos. O Sangue de Dragão (Croton lechleri), por auxiliar na formação de novo colágeno e apresentar propriedades cicatrizante, anti-inflamatória, antimicrobiana, pode ser um meio promissor. Nesse contexto, o objetivo deste trabalho foi avaliar a eficácia da seiva Sangue de Dragão como meio de estocagem para dentes avulsionados por meio da aferição da viabilidade funcional e metabólica celular. Foi testada a diluição a 10% da seiva Sangue de Dragão e como controle, sua diluente solução tampão salina-fosfato (PBS). O leite ultrapasteurizado integral foi utilizado como meio comparativo por ser tradicionalmente utilizado e indicado para esse fim. O controle positivo utilizado foi o DMEM e o controle negativo, a água destilada. Este estudo in vitro comparou a eficácia dos meios para a manutenção da viabilidade de dois tipos celulares: mononucleares de sangue periférico humano e do ligamento periodontal mantidas em cultura. A avaliação da viabilidade foi feita por meio dos testes de exclusão por Azul de Tripan e colorimétrica a base de tetrazolato (MTT), sendo determinada nos tempos 1, 3, 6, 10 e 24h de incubação. Os ensaios foram repetidos 4 vezes, em triplicata para o MTT. A seiva Sangue de Dragão apresentou bons resultados. Para a metodologia com o Azul de Tripan, a seiva Sangue de Dragão foi semelhante ao leite (p>0,0001), ambos com os melhores valores de viabilidade, e para o MTT apresentou resultados superiores a todos os meios, inclusive o leite (p<0,0001). Com base nos resultados apresentados, conclui-se que a seiva Sangue de Dragão foi tão eficaz quanto o Leite, meio tradicionalmente utilizado para estocagem de dentes avulsionados, apresentando bom desempenho ao manter a integridade da membrana dos diferentes tipos celulares e a viabilidade...

The success of tooth replantation depends on the condition of the cemental periodontal ligament post-avulsion. Avulsed tooth storage medium is one of the factors that interferes in the vitality of the periodontal ligament. The Dragon`s Blood sap helps in the formation of new collagen and has been shown healing properties, as well anti-inflammatory, antiviral, antimicrobial and antitumor properties, in which aroused interest in the use as storage medium for avulsed teeth. Thus, the aim of this study is to evaluate the effectiveness of Dragon`s Blood sap as storage medium for avulsed teeth by measuring the functional and metabolic cell viability. It was tested 10% dilution of the sap, and as a control, the diluent phosphate-buffered saline (PBS). Milk was used as comparative because of that is the storage medium traditionally and indicated. The positive control used was DMEM cell culture medium and the water as negative control. This in vitro study compared the effectiveness of the means for maintaining the viability of both cell types: human peripheral blood mononuclear cells and periodontal ligament cells maintained in culture. The cell viability was analyzed by the trypan blue staining exclusion method and the tetrazolium-based colorimetric assay (MTT) and determined at 1, 3, 6, 10 and 24h of incubation. The tests were repeated 4 times, in triplicate for MTT. Dragon`s Blood sap provided positive results. For the trypan blue staining exclusion method, the Dragon`s Blood was similar to milk (p> 0.0001) over time, both with the best values of viability, and for the MTT assay it`s presented better results than all means, including milk (p <0.0001). Therefore, based on the results presented, it was concluded that Dragon’s Blood sap was as effective as milk, traditionally storage medium used and/or indicated for avulsed teeth, showing good performance while maintaining the integrity of the membrane of different cell types and functional viability of periodontal...

Avaliação in vitro do potencial biológico da Salvia officinalis L. em células tumorais / In vitro evaluation of the biological potential of Salvia officinalis L. in tumor cells

Objetivos: Determinar a viabilidade celular frente ao efeito biológico do extrato hidroalcoólico de Salvia officinalis L. em culturas de células tumorais de laringe (Hep-2) e células de hepatoma humano (HepG2).Métodos: Células tumorais Hep-2 e HepG2 foram cultivadas em meio DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Médium)suplementado com 10% soro fetal bovino inativado e 1% de antibiótico (Penicilina/Estreptomicina) em estufa a 37°Ce atmosfera umidificada com 5% de CO2. Na segunda etapa foram semeadas (5×104 células/mL) em placas de 96 poçosdurante o período de 24 horas até obtenção de 60-70% de confluência e realizou-se o tratamento das células com extratohidroalcoólico de Salvia officinalis L., controle negativo de etanol 80% (v/v) e controles positivos de peróxido de hidrogênio(H2O2), tert-butil hidroperóxido (t-BOOH), doxorrubicina e cisplatina. A viabilidade celular foi determinada pela reduçãodo MTT (brometo de 3-(4,5 dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolio). Os resultados foram analisados pelo teste de Tukeyno programa SPSS v.19.Resultados: O extrato hidroalcoólico de Salvia officinalis L. mostrou atividade citotóxica para células tumorais Hep-2 IC500,38±0,02 mg/mL e para HepG2 IC50 0,54±0,03 mg/mL em comparação ao controle negativo, ficando acima do IC50 obtidopara seus controles positivos. A cisplatina apresentou IC50 abaixo do extrato de sálvia, porém para a obtenção do seu IC50aumentou-se o tempo de exposição em seis horas.Conclusões: Sugere-se que o extrato de Salvia officinalis L. tem atividade biológica em células tumorais, podendo serobjetivo de mais estudos com a finalidade de comprovar sua eficácia como possível agente para o tratamento do câncer.

Aims: To determine cell viability compared to the biological effect of Salvia officinalis L. extract on cultured tumor cells of the larynx (Hep-2) and in human hepatoma cells (HepG2). Methods: Tumor cells Hep-2 and HepG2 were grown in DMEM (Dulbecco’s Modified Eagle Medium) supplemented with 10% inactivated fetal bovine serum and 1% antibiotics (Penicillin/Streptomycin), incubated at 37°C and 5% CO2. In the second step they were plated (5×104 cells/mL) in 96 well plates during 24 hours to obtain 60-70% confluency, and treated with the hydroalcoholic extract of Salvia officinalis L., negative control with 80% ethanol (v/v) and positive control of hydrogen peroxide (H2O2), tert-butyl hydroperoxide (t-BOOH), doxorubicin and cisplatin. Cell viability was determined by MTT reduction (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide). Results were analyzed by Tukey test using the SPSS v.19. Results: The hydroalcoholic extract of Salvia officinalis L. showed cytotoxic activity to tumor cells Hep-2 IC50 0,38±0.02 mg/mL for HepG2 IC50 0,54±0.03 mg/mL compared to negative control, staying above the IC50 obtained for their positive controls. Cisplatin showed IC50 below the extract of sage, but to obtain the IC50 exposure time was increased in six hours. Conclusions: The results of this study suggest that the extract of Salvia officinalis L. has biological activity against tumor cell; further studies are needed to confirm its efficacy and its potential role in cancer treatment.

Efeito da laserterapia na viabilidade de macrófagos e sua produção de óxido nítrico frente a cimentos endodônticos / Effect of phototherapy on macrophages viability and yuor nitric oxide production against to sealers

O presente estudo avaliou o efeito da fototerapia com o laser de baixa intensidade (LBI) infra-vermelho próximo (InGaAsP: LASERTable; λ780 ± 3 ᢡ m, 25 mW) em linhagem celular de macrófagos de camundongos (RAW 264.7) expostos à diferentes cimentos endodônticos. Os grupos foram divididos de acordo com o material obturador e a presença ou não de irradiação, além dos grupos controle, sendo: G1: controle negativo - somente células, G2: células + laser, G3: controle positivo ­ LPS, G4: LPS + laser, G5: Endofill, G6: Endofill + laser, G7: AH Plus, G8: AH Plus + laser, G9: Sealapex e G10: Sealapex + laser. A viabilidade celular foi determinada por meio do teste de MTT e a produção de óxido nítrico (NO) pelo método de Griess. A irradiação com LBI influenciou significativamente a viabilidade de macrófagos expostos aos três materiais obturadores (p<0,001), sendo que o G8 foi o que resultou em maior número de células viáveis (p<0,001). Não houve interferência do LBI sobre a produção de óxido nítrico em nenhum dos grupos estudados. Concluiu-se que todos os cimentos endodônticos permitiram índices significativamente maiores de viabilidade celular quando da aplicação do LBI; o cimento AH Plus apresentou aumento significativamente maior de viabilidade dos macrófagos em relação aos demais cimentos quando da aplicação do LBI , seguido do Sealapex e Endofill; o LBI não interferiu de forma significativa na produção de NO por parte dos macrófagos expostos a nenhum dos cimentos endodônticos estudados

The present study evaluated the effect of phototherapy with low intensity laser (LLLT) near infrared (InGaAsP: LASERTable; λ780 ± 3 ᢡ m, 25 mW) in cell line mouse macrophages (RAW 264.7) exposed to different sealers. All the groups were divided according to the filling material with presence or absence of irradiation: G1: negative control - only cells, G2: laser + cells, G3: positive control - LPS, G4: LPS + laser , G5: Endofill, G6: Endofill + laser, G7: AH Plus, G8: AH Plus + laser, G9, G10 and Sealapex: Sealapex + laser. Cell viability was determined using the MTT assay and production of nitric oxide (NO) by the Griess method. The irradiation with LLLT significantly affect the viability of macrophages exposed to three filling materials (p <0.001), and the G8 was resulted in a greater number of viable cells (p <0.001). There was no interference from the LBI on nitric oxide production in any groups. It was concluded that all the sealers was significantly higher levels of cell viability when applying the LBI, and the AH Plus showed significantly greater viability of the macrophages relative to the other cements when applying the LBI, and followed by Sealapex Endofill; the LBI didn't interfere significantly in the production of NO by macrophages exposed to any sealers studied

Keratinocyte growth factor protected cultured human keratinocytes exposed to oxidative stress / Fator de crescimento de queratinócitos protegeu queratinócitos humanos cultivados expostos ao estresse oxidativo

PURPOSE: To evaluate effects of oxidative stress and supplementation of keratinocyte growth factor (KGF) on cultivated human keratinocytes. METHODS: Oxidative stress was produced through addition of hydrogen peroxide (H2O2) to the culture medium. Cultivated human keratinocytes were divided in 4 groups: Group control (G C), Group KGF (G KGF), Group H2O2 (G H2O2), Group H2O2 and KGF (G H2O2-KGF). Each experiment was accomplished with the same lineage cultivated keratinocytes, in triplicate. Cell viability was evaluated by trypan blue exclusion assay. RESULTS: The results showed that the culture medium supplemented with KGF presented a small rate of cell viability when compared to cells only in culture medium (p<0,001). It demonstrated that only the growth factor does not have protector effects for cells in vitro. However, in front of the oxidative stress produced by addition of hydrogen peroxide to the medium, KGF showed a beneficial effect, protecting cells when compared to the group that suffered hydrogen peroxide action but had not been exposed to KGF (p<0,001). CONCLUSION: KGF determined protection to the primary human keratinocytes exposed to oxidative stress.

OBJETIVO: Avaliar os efeitos do estresse oxidativo e da suplementação do fator de crescimento de queratinócitos (KGF) em queratinócitos humanos cultivados. MÉTODOS: O estresse oxidativo foi produzido através da adição de peróxido de hidrogênio (H2O2) ao meio de cultura. Os queratinócitos humanos cultivados foram divididos em quatro grupos: grupo controle (G C), grupo KGF (G KGF), grupo H2O2 (G H2O2), grupo H2O2 e KGF (G H2O2-KGF). Cada experimento foi realizado com a mesma linhagem celular, em triplicata. A viabilidade celular foi avaliada pelo ensaio da exclusão do azul de tripan. RESULTADOS: Os resultados mostraram que o meio de cultura suplementado com o KGF apresentou menor taxa de viabilidade celular quando comparado às células do grupo controle (p<0,001). Isso mostra que somente o fator de crescimento de queratinócitos não apresentou efeito protetor às células em cultura. Entretanto, frente ao estresse oxidativo produzido pela adição do peróxido de hidrogênio ao meio de cultura, o KGF mostrou efeito benéfico, protegendo as células quando comparado ao grupo que sofreu a ação do estresse oxidativo, mas que não foi exposta ao KGF (p<0,001). CONCLUSÃO: O KGF determinou a proteção aos queratinócitos humanos primários cultivados expostos ao estresse oxidativo.

Avaliação comparativa da viabilidade celular imediata após osteotomia para implantes com fresas e piezocirurgia em tíbias de coelhos: análise imunoistoquímica / Comparative assessment of cell viability immediately after osteotomy for implants with drills and piezosurgery®: immunohistochemistry analysis

O propósito desse trabalho foi avaliar o efeito da osteotomia para implantes sobre a viabilidade celular óssea imediata, comparando a utilização de fresas do sistema convencional com a piezocirurgia em tíbias de coelhos. Foram utilizados 6 coelhos machos, divididos em 2 etapas: (1) Fresas – 5 grupos (G1 a G5) correspondentes às osteotomias 10, 20, 30, 40 e 50 vezes, respectivamente. Cada leito ósseo recebeu a sequência de fresas: lança e helicoidais de 2,0 mm, 2,8 mm, 3,0 mm e 3,15 mm; (2) Piezocirurgia – 5 grupos (P1 a P5) correspondentes às osteotomias 10, 20, 30, 40 e 50 vezes, respectivamente, efetuadas pela sequência de pontas de 2,0 e 3,0 mm, mediante vibração ultrassônica piezoelétrica. As áreas osteotomizadas foram coletadas e processadas laboratorialmente. A análise imunoistoquímica demonstrou equilíbrio das expressões de OPG e RANKL, ou seja, formação e reabsorção óssea, tanto nas osteotomias com fresas, quanto na piezocirurgia, embora mais intensas nesta última. A expressão de OC apresentou-se bastante intensa nos grupos de piezocirurgia, mas com redução da imunomarcação a partir da 30ª osteotomia, enquanto manteve-se constante nos grupos fresados. A CAS3 evidenciou a viabilidade osteoblástica a partir da 20ª osteotomia com piezocirurgia e manteve-se constante até a 50ª. No grupo de fresas, notou-se aumento gradativo da expressão dessa proteína, conforme o aumento do número de osteotomias. De acordo com a metodologia aplicada, foi possível concluir que a piezocirurgia propicia maior viabilidade celular osteoblástica do que o sistema de fresas convencional

The purpose of this study was to evaluate the effect of the osteotomy implant on bone cell viability immediately, comparing the use of conventional drilling system with piezosurgery® in tibiae of rabbits. We used 6 male rabbits were divided into 2 stages: (1) Drilling - 5 groups (G1 to G5) corresponding to the 10 osteotomies, 20, 30, 40 and 50 times respectively. Each received a bone bed following drills: Spear drill and 2.0 mm, 2.8 mm, 3.0 mm and 3.15 mm helicoidal drills, (2) Piezosurgery® - 5 groups (P1 to P5) corresponding to the 10 osteotomies, 20, 30, 40 and 50 times, respectively, analyzed by the sequence of inserts 2 and 3 mm by piezoelectric ultrasonic vibration. The receptor-beds were collected and processed in a laboratory. The immunohistochemical analysis showed balance expressions of OPG and RANKL, ie bone formation and resorption in both the osteotomies with drills and piezosurgery®, although more intense in the latter. The expression of OC had become quite intense in piezosurgery® groups, but with reduced immunostaining from the 30th osteotomy, while remained unchanged in groups drilled. The CAS3 showed the viability of the osteoblast from the 20th osteotomy with piezosurgery® and remained constant until the 50th. In the group of drills noticed a gradual increase in the expression of this protein, as the increase in the number of osteotomies. According to the methodology, it was concluded that the piezosurgery® provides greater osteoblastic cell viability than the system of conventional drilling

Retinal incorporation and differentiation of mesenchymal stem cells intravitreally injected in the injured retina of rats / Incorporação e diferenciação retiniana de células tronco mesenquimais intravítreas em ratos

PURPOSE: To evaluate the pattern of retinal integration and differentiation of mesenchymal stem cells (MSCs) injected into the vitreous cavity of rat eyes with retinal injury. METHODS: Adult rat retinas were submitted to laser damage followed by transplantation of DAPI-labeled BM-MSCs grafts. To assess the integration and differentiation of BM-MSCs in laser-injured retina, host retinas were evaluated 2.4 and 8 weeks after injury/transplantation. RESULTS: Our results demonstrated that the grafted cells survived in the retina for at least 8 weeks and almost all BM-MSCs migrated and incorporated into the neural retina, specifically in the outer nuclear layer (ONL), inner nuclear layer (INL) and ganglion cell layer (GCL) while a subset of grafted cells were found in the subretinal space posttransplantation. At 8 weeks immunohistochemical analysis with several retinal specific markers revealed that the majority of the grafted cells expressed rhodopsin, a rod photoreceptor marker, followed by parvalbumin, a marker for bipolar and amacrine cells. A few subsets of cells were able to express a glial marker, glial fibrillary acidic protein. However, grafted cells failed to express pan-cytokeratin, a retinal pigment epithelium marker. CONCLUSIONS: These results suggest the potential of BM-MSCs to differentiate into retinal neurons. Taken together, these findings might be clinically relevant for future mesenchymal stem cell therapy studies concerning retinal degeneration repair.

OBJETIVO: Avaliar o padrão de integração e diferenciação retiniana de células tronco mesenquimais (CTM) injetadas na cavidade vítrea de ratos portadores de lesões retinianas. MÉTODOS: Ratos Wistar adultos foram submetidos a múltiplas lesões retinianas utilizando-se YAG laser e injeção intravítrea de células tronco mesenquimais. A fim de se avaliar a integração e diferenciação retiniana, o tecido retiniano lesado pelo YAG laser / tratado pelas células tronco, foi avaliado 2, 4 e 8 semanas após a lesão. RESULTADOS: As células injetadas na cavidade vítrea sobreviveram na retina por pelo menos 8 semanas e quase todas células tronco mesenquimais migraram e incorporaram-se na retina neural, especificamente nas camadas nucleares externa e interna e camada de células ganglionares. Uma pequena quantidade de células foi encontrada no espaço sub-retiniano. A análise imuno-histoquímica de 8 semanas mostrou que a maioria das células injetadas expressou rodopsina (marcador para fotorreceptores), parvalbumina (marcador para células bipolares e amácrinas), GFAP (marcador de células gliais). As células injetadas não expressaram a pancitoqueratina, que é a marcadora de células do epitélio pigmentar da retina. CONCLUSÕES: Ocorre aparente diferenciação e incorporação de células tronco mesenquimais na retina de ratos após injeção intravitrea destas células.

Avaliação do aquecimento ósseo, da viabilidade celular imediata e da deformação de fresas de alta resistência após osteotomia para implantes em tíbias de coelhos / Evaluation of bone heating, immediate bone-cell viability and of high resistance drills wear after implant osteotomies in rabbits tibia

O propósito deste trabalho foi avaliar a influência da reutilização de fresas de alta resistência sobre o aquecimento ósseo, a viabilidade celular imediata e a deformação das fresas após osteotomia para implantes em tíbias de coelhos. Para isso, foram utilizados 12 coelhos machos brancos (Oryctolagus cunilicus, Nova Zelândia), que foram submetidos a 200 sequências de fresagens para implantes na cortical superior de suas tíbias. Foram estabelecidos 6 grupos (G1 a G6) que correspondiam ao número de osteotomias realizadas por cada fresa (0, 10, 20, 30, 40 e 50). Cada leito cirúrgico recebia a seguinte sequência de fresagem: fresa tipo lança e helicoidais de 2,0mm, 2,8mm, 3,0mm e 3.15mm. As áreas osteotomizadas foram coletadas para análise imunoistoquímica, as oscilações térmicas foram quantificadas e as fresas utilizadas receberam análise por microscopia eletrônica de varredura. Nos resultados, houve uma correlação alta entre a porcentagem de deformação e o número de reutilização de cada fresa (Coeficiente de Correlação de Pearson r = 0,984). Observou-se também que as fresas do tipo lança apresentaram maior deformação após o uso do que as fresas helicoidais (proporção de 2:1). Não houve correlação estatística significativa entre aumento da reutilização da fresa e aquecimento ósseo (p > 0,05). No entanto, observouse que a oscilação térmica durante a fresagem da lança é maior que as demais fresagens (proporção de 3:1). Na análise imunoistoquímica, observou-se um equilíbrio fisiológico da expressão das proteínas Osteoprotegerina e RANKL em todos os grupos, no entanto, houve maior expressão de todas as proteínas no Grupo 6. De acordo com a metodologia aplicada, foi possível concluir que as fresas avaliadas não causam aquecimento ósseo significativo em até 50 reutilizações, no entanto, causam maior trauma tecidual na 50ª fresagem. Dessa forma, o sistema avaliado deve ser reutilizado por no máximo 40 vezes, com substituição da fresa lança por 20 osteotomias

The purpose of this study was evaluate the influence of high resistence drill reuse over bone heating, immediate bone-cell viability and drills wear after implant osteotomies in rabbit tibias. Therefore, 12 male white rabbits (Oryctolagus cunilicus, New Zealand) received 200 implant sequential osteotomies over the superior cortical of their tibia. Six groups were established (G1 to G6), according to the number of osteotomy of each drill (0, 10, 20, 30, 40 and 50). The implant sequence of drills was: spear drill, 2,0mm, 2.8mm, 3.0mm and 3.15mm helicoidal drills. The receptor-beds were collected to imunohistochemistry, the thermal changes were quantified and the drills received scanning electron microscopy analysis. In the results, a great correlation degree between drill wear and number of osteotomies was observed (Pearson’s Correlation Coefficient r = 0,984). Another result was that spear drill have more deformation than helicoidal drills (2:1 proportion). The bone heating analysis concluded that there was no statistical siginificance between number of osteotomy and bone heating (p > 0,05). However, the thermal changes during spear drilling was greater than during helicoidal drillings (3:1 proportion). Imunohistochemistry results showed a physiological balance of Osteoprotegerin and RANKL immunolabeling in all groups, however there was a greater immunolabeling of all proteins in the last group. According to this metodology, the conclusion is that the tested drills do not caused significant bone heating after 50 reuses, however, they caused more tissue trauma at 50th osteotomy. So, the studied system must be reused for 40 times, and the spier drill must be substituted after 20 osteotomies

Viabilidade celular da mucosa do intestino delgado de ratos, após correção de choque hipovolêmico com solução de NaCl 7,5%

PURPOSE: Study the effect of the volemic correction with different solutions, in the mucous of the small bowel in rats. METHODS: Were used 120 rats Wistar (Rattus norvegicus albinus), males, adults, seemingly healthy, with individual weight varying between 310 and 410g, originating from of the Instituto Evandro Chagas of Belém of Pará, submitted to an adaptation period of 15 days, receiving water and ration ad libitum, during the role experiment. For the research, ten animals were distributed, in groups and subgroups as following: Standard group (S), Shock group (Sh), Physiological Solution group (PS) and Hypertonic Solution Group (HS). The groups were divided in subgroups with 10 animals each, in agreement with the day of postoperative (DPO) foreseen for the euthanasis of the animals, (1st, 3rd or 7th DPO), being after this, picked material for cellular viability in every animals. RESULTS: The group PS took less quantity viable cells. CONCLUSION: The volemic correction with chloride of sodium solution at 7.5%, when compared the correction with chloride of sodium at 0.9% (isotonic solution), took the maintenance of larger amount of viable cells, in the small bowel in rats.

OBJETIVO: Estudar o efeito da correção volêmica com diferentes tipos de solução, na mucosa do intestino delgado de ratos. MÉTODOS: Foram utilizados 120 ratos Wistar (Rattus norvegicus albinus), machos, adultos, com peso individual entre 310 e 410g, oriundos do Instituto Evandro Chagas de Belém do Pará, submetidos a período de adaptação por 15 dias, recebendo água e ração ad libitum, durante todo o experimento. Os animais foram distribuídos em: Grupo Padrão (P), Grupo Choque (C), Grupo Solução Fisiológica (SF) e Grupo Solução Hipertônica (SH), com 30 animais cada. Estes foram divididos em subgrupos com 10 animais cada, de acordo com o dia de pós-operatório (DPO) previsto para a eutanásia dos animais, (1º, 3º ou 7º DPO), sendo após esta, colhido material para realização de teste de absorvância pelo MTT em todos os animais. RESULTADOS: O grupo SF apresentou menores índices de viabilidade celular comparado aos grupos SH e C (p 0.05). CONCLUSÃO: A correção volêmica com solução de cloreto de sódio a 7.5% levou a manutenção de maior quantidade de células viáveis, no intestino delgado em ratos no 7º dia do experimento.